固定波長(zhǎng)分光光度計(jì)通過(guò)測(cè)量物質(zhì)在特定波長(zhǎng)下的光的吸收程度,來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)物質(zhì)的定性和定量分析。這種吸收程度與物質(zhì)的濃度成比例關(guān)系,這一關(guān)系符合比爾定律(Beer's Law)或其等價(jià)形式朗伯-比爾定律(Lambert-Beer Law)。
比爾定律的表達(dá)式為:A = εcb,其中A為吸光度,ε為摩爾吸光系數(shù)(或稱為吸收系數(shù)),c為吸光物質(zhì)的濃度,b為光程長(zhǎng)(即光通過(guò)樣品的路徑長(zhǎng)度)。在固定波長(zhǎng)下,ε和b為常數(shù),因此A與c成正比。
光源:
固定波長(zhǎng)分光光度計(jì)采用能夠發(fā)出特定波長(zhǎng)光的光源。這個(gè)光源可以是鎢燈(用于可見(jiàn)光區(qū))或氫燈(用于紫外光區(qū))等。光源發(fā)出的光經(jīng)過(guò)一系列分光裝置(如濾光片、光柵等),以產(chǎn)生所需波長(zhǎng)的單色光。
單色器:?jiǎn)紊髫?fù)責(zé)將光源發(fā)出的復(fù)合光分解為單色光,并允許特定波長(zhǎng)的光通過(guò)。它是分光光度計(jì)中的核心部件之一,由入射狹縫、準(zhǔn)直鏡、色散元件(如光柵)和物鏡等組成。
樣品室:在樣品室中,放置有待測(cè)的溶液或樣品。當(dāng)單色光通過(guò)樣品時(shí),部分光被樣品吸收,剩余的光則透過(guò)樣品進(jìn)入檢測(cè)器。
檢測(cè)器:檢測(cè)器將透過(guò)樣品的光信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào)。這個(gè)電信號(hào)與樣品的吸光度成正比,因此可以通過(guò)測(cè)量電信號(hào)的大小來(lái)推算出樣品的吸光度。
數(shù)據(jù)處理系統(tǒng):數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)對(duì)檢測(cè)器輸出的電信號(hào)進(jìn)行放大、處理和計(jì)算,得到樣品的濃度或其他相關(guān)參數(shù)。
固定波長(zhǎng)分光光度計(jì)具有操作簡(jiǎn)便、測(cè)量準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)。它廣泛應(yīng)用于各種領(lǐng)域,如環(huán)境監(jiān)測(cè)、藥物分析、食品檢驗(yàn)等。在這些領(lǐng)域中,可以用于測(cè)定各種物質(zhì)的濃度,如重金屬離子、有機(jī)物、無(wú)機(jī)物等。